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전기영동법
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아가로스 겔 전기영동법에서 DNA 이동속도에 영향을 주는 요인 아기로스 겔(agarose gel)은 해상도는 낮으나 아주 넓은 범위(200 bp~50 kb)의 DNA나 RNA 시료를 간편하게 분리할 수 있기 때문에 가장 흔히 사용된다. 겔로 사용되는 아가로스는 해초에서 추출되는 물질로서 선형 중합체의 형태를 띤다. 아가로스를 적당한 완충용액에 녹여서 원하는 크기의 틀에 부어서 겔이 굳은 후에 사용할 수 있는데, 그 밀도는 아가로스의 농도에 따라 정해진다.전기장 안에서 음전하를 띠는 DNA가 양극으로 이동하는 데 일반적으로 DNA의 크기와 전기장에서의 이동성(mobility)은 로그함수로 반비례한다. 왜냐하면 큰 분자는 작은 분자보다 겔의 구멍을 지나가기 어렵기 때문이다. 같은 크기의 DNA 분자라도 아가로스의 농도가 커지면 아가로스 겔의 그물구조(network st.. 2017. 11. 22.
전기영동(electrophoresis)의 원리 전기영동(electrophoresis)은 생체 고분자들의 성질을 연구하고, 그것들 을 분석, 분리, 정제하는 중요한 방법 중에 하나이다. 전기영동법으로 DNA, RNA나 단백질 등을 분리할 수 있는 것은 이들 분자가 고유의 전 하를 띠고있어 전기장(electric field)에 놓이게 되면 서로 다른 속도로 이 동할 수 있다는 것에 근거하고 있다. 전기영동의 원리 완충용액 속에서 거대분자(macromolecule)들은 전하를 띠게 된다. 예를 들어 DNA는 음전하를 띠며 단백질은 용액의 pH가 등전점(pI)보다 높으면 즉, 수소이온의 농도가 낮으면 음전하를 띠고, pH가 pI보다 낮으면 (즉, 수소이온 농도가 높으면) 양전하를 띤다. pI는 단백질의 순전하(net charge)가 0이 되는 pH이다. 용.. 2017. 11. 22.